jueves, 5 de julio de 2012






INVESTIGAN EL DESARROLLO DE UNA VACUNA PARA SÍFILIS

Para el desarrollo de una vacuna contra la sífilis es necesario ubicar la investigación en un contexto genómico e inmunológico. La identificación de proteínas en la superficie de T. pallidum es de gran relevancia, como son las proteínas de membrana externa:


La bioinformática se ha convertido en la herramienta de mayor importancia en el proceso de diseño de nuevas vacunas. Los eventos principales en vacunología reversa son:

  • Disponer de la secuenciación completa del genoma del agente patógeno (p.ej. T. pallidum).
  • Selección in silico o por computadora de genes que expresen proteínas de importancia inmunológica.
  • Clonación de los genes seleccionados y expresión de las proteínas.
  • Purificación de las proteínas recombinantes.
  • Ensayos in vitro e in vivo apropiados.
En la actualidad la vacunación contra la sífilis se ha logrado con relativo éxito en animales de laboratorio con treponemas previamente irradiados.




Una protección parcial se ha logrado con treponemas tratados con antifomina. También se ha intentado la vacunación con treponemas mantenidos a 4 o C y la adición de proteínas recombinantes o nativas de T. pallidum subs. pallidum, como la proteína de 4kD, endoflagelos purificados, las proteínas recombinantes como TmpB, TprK y la 6pd (glicerolfosfodiéster fosfodiesterasa)

martes, 3 de julio de 2012








SÍFILIS Y CÉLULAS MADRE

¿Es posible?


Pacientes con VIH y portadores de sífilis no pueden recibir trasplante de células madre. 








SÍFILIS CONGÉNITA

La infección del producto in útero ocurre cuando la madre presenta espiroquetemia recurrente periódica, y el feto se puede ver afectado dependiendo de la fase del embarazo. El contagio al nacimiento es posible cuando el producto se expone al canal del parto infectado. 

No se ha evidenciado el tratamiento con células madre ya que es innecesario porque la utilización de antibióticos es eficaz.

El empleo de Penicilina G sódica 3-4millones cada 4 horas EV, durante 10-14 días o penicilina procaína 2,4 millones al día durante 10-14 días destruyen el agente y con él a la enfermedad.

domingo, 1 de julio de 2012

Clonacion: Purificación de la proteína recombinante TmpA de Treponema pallidum mediante cromatografía de

afinidad por iones metálicos . 


En la cepa W3110 de E. coli se obtuvieron dos variantes de la proteína de membrana de Treponema pallidum (TmpA-His y TmpA). La TmpA-His fue clonada en un vector que adiciona una secuencia que codifica una cola de seis histidinas en el extremo carboxilo, y su purificación se realizó mediante cromatografía de afinidad por iones metálicos inmovilizados (IMAC, según sus siglas en inglés). 



Se empleó la matriz Sepharose 4B-IDA y los iones metálicos Ni 2+ y Cu 2+ como ligandos. 



Esta cromatografía rápida y de un solo paso, permitió aumentar el grado de pureza inicial de la TmpA-His de 20% hasta 90%. El rendimiento final fue de 70% y la capacidad de carga de la matriz fue de 1 mg/mL. La TmpA se purificó mediante la técnica de electroelución y su recobrado fue de 1 mg por cada corrida cromatográfica. El uso de ambas proteínas en el diagnóstico de la sífilis, se evaluó mediante un ensayo ELISA con el uso de un panel de sueros positivos y negativos. No se encontraron diferencias en relación con el comportamiento serológico de ambos antígenos, lo que sugiere el uso potencial de la TmpA-His en el desarrollo de sistemas diagnósticos para la detección de la sífilis.